植物培養(無性生殖)

◎九層塔無性繁殖，用扦插即可，只要剪取無花頂芽，去除底部太多的葉片，在18~ 25℃之溫度下，很容易扦插成苗。◎九層塔沒有聽說過有人用需要高深技術及高貴設備的『生長點組織培養』來繁殖，當然也不知道培養基是需要那些配方。以『國1生』來講太不實際了。◎如真的有辦法花大錢去做，下面有生長點組織培養的步驟，配方以嘉德麗雅蘭為例(九層塔是否可用，請自行實驗)。詳細請看： [生長點組織培養過程1][2]◎生長點組織培養共有六大步驟:1.準備器具。2.調製培養基。3.高壓殺菌鍋殺菌。4.切取生長點。5.培養芽球。6.分割芽球。雖然培養基的配方可能不相同,但調製和殺菌的重點都相同。○培養溫度以15~ 20 ℃下最佳,所以在本省培養作業應避免在5~9月間進行,10~2月天氣冷涼時成功率較高。◎MS培養基調配法：下列五種溶液均貯藏於冰箱中,使用時再加以調配。各種化學藥品,可到化工原料行購買。添加物另有Hyponex 7-6-19 (花寶一號).果汁.活性碳等材料,個人之添加量常被視為秘方。○-溶液1: NH4NO3硝酸銨-165g KNO3硝酸鉀-190g KH2PO4磷酸二氫鉀-17g H3BO3硼酸-620mg MnSO4.4H2O硫酸錳-2230mg ZnSO4.4H2O硫酸鋅-860mg Kl碘化鉀-83mg Na2.MoO4.2H2O鉬酸鈉-25mg CuSO4.5H2O硫酸銅-2.5mg CoCl2.6H2O氯化鈷-2.5mg 以1.5公升的蒸餾水,遞次使上述各項化合物溶解後,再添加至2公升。(50倍溶液) ○-溶液2: CaCl2.2H2O氯化鈣 - 44g 溶解於蒸餾水內,使其成為1公升 。(100倍溶液)○-溶液3: MgSO4.7H2O硫酸鎂 - 37g 溶解於蒸餾水內,使其成為1公升 。(100倍溶液) ○-溶液4: FeSO4.7H2O硫酸亞鐵-2.78g Na2 EDTA -3.73g 溶解於蒸餾水內,使其成為1公升。(100倍溶液) ○-溶液5: Thiamine維他命B1 -20g Nicotinic Acid菸酸 -100mg Pyridoxine維他命B6-100mg Myo-lnositol肌醇 -20mg Glycine甘氨酸-400mg 溶解於蒸餾水內,使其成為1公升。(200倍溶液) ◎調配方法1)蒸餾水(500ml)+溶液1(20ml) )+溶液2(10ml) )+溶液3(10ml) )+溶液4(10ml) )+溶液5(5ml)+蔗糖( 30g )添加蒸餾水至1公升(調配1公升為例)2)添加已溶解過的NAA(植物荷爾蒙)10ml,BA(胞質分裂素)1ml。(分別用濃度為100PPM之溶液;即各取20mg,NAA先溶在少量酒精,BA溶在少量微鹼性水分,加水至20ml而成。)3)以磁質攪拌器或玻璃棒攪拌,使其混合。4)利用1規度(N)的鹽酸(HCl).KOH及NaOH,調整PH至5.7~5.8之間(可用PH儀表或試紙測試)。5)添加洋菜7~ 10g 加熱使洋菜完全溶解。(注意調節硬度)6)再用漏斗將培養基分別注入三角瓶。7)瓶口蓋上橡皮塞。(瓶塞中央的孔隙已塞入棉花)8)用高壓殺菌鍋以壓力1.1~ 1.2kg /c㎡,殺菌15~20分鐘。◎組織培養法1)用消毒過的剪刀將新芽剪下,再用肥皂水清洗乾淨。2)用消毒過的手術刀切除外層包被的芽鞘,必須小心操作。3)新芽用1%展著劑混合0.5%次氯酸鈉溶液(NaClO),消毒10分鐘。4)消毒時瓶口要蓋上橡皮塞,再用鋁箔紙封口。用手連續用力振動7~10分鐘。5)各種刀具.器具用酒精燈火焰消毒,準備切取生長點。6)消毒後,將芽筍取出。注意看! 最頂端的部位就是生長點。7)用手術刀將生長點切下。其體積極小,約0.2cm 左右。8)生長點用無菌水漂洗後,立即放入液體培養基中。9)瓶口用橡皮塞蓋緊,再用鋁箔紙封蓋瓶口,防止細菌侵入。10)再將瓶管放在旋轉培養機上,不斷旋轉。11)15~30天後,生長點細胞組織逐漸膨大分裂,此時可以進行分割。12)若將分割後的分生組織,放入三角瓶培養基上,即能固定分化長成幼苗。參考資料: [游老師的部落格]