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利用本立德試驗測定還原糖含量
本立德溶液用以測試還原糖的存在。在熱的鹼性溶液中,還原糖將藍色的
銅(II)離子還原為磚紅色的氧化銅(I)沉澱物。在起化學變化時,混合物的顏
色會由藍色逐漸轉為綠、黃、橙,最後是紅色。如將各項因素小心控制,
則還原糖的分量直接影響混合物的顏色和沉澱物的多少。因此,在大多數
情況下,比較樣本及葡萄糖標準溶液的顏色和沉澱物的數量,即可估計樣
本中還原糖的含量。
步驟
1. 用 2%葡萄糖溶液和蒸餾水製備下列濃度的
葡葡糖標準溶液:0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、
1.2% 和1.4%。
2. 用移液管從每一葡萄糖標準溶液中吸取
0.5 cm3 溶液,然後分別放入已標示及盛有
5 cm3 本立德溶液的試管內,並加以搖勻。
3. 將一種含還原糖的樣本(例如不知濃度的葡
萄糖液或提子提取液),用蒸餾水依據1:2、
1:5、1:10、1:20、1:50 和1:100 的比例稀釋。
4. 用移液管吸取 0.5 cm3 步驟3 的未稀釋及各
已稀釋溶液,分別放入另一組已標示及盛有
5 cm3 本立德溶液的試管內,並加以搖勻。
5. 將全部試管放在盛有沸水的水浴器中,加熱
三分鐘。
6. 從水浴器中取出所有試管,不待冷卻,立刻
觀察各試管內混合物的顏色,依顏色深淺將
它們排列起來。
7. 將各樣本內混合物的顏色與葡萄糖標準溶
液的顏色比較。最接近某一標準溶液顏色的
樣本,其還原糖含量大約相等於該標準溶液
之葡萄糖含量。
8. 計算未稀釋溶液中的還原糖含量。
註
1. 這方法可測定樣本中的全部具還原性物
質,故此還原糖以外的其他物質(例如抗壞血
酸)都能還原熱的鹼性銅(II)離子,引致誤差。
2. 此反應與溫度改變、加熱時間和鹼性程度有
關。因此,每次測定均須在固定情況下進
行,標準溶液、未稀釋溶液和稀釋溶液均必須放在同一水浴器內加熱。
另一實驗方法
步驟
1. 用 2%葡萄糖溶液和蒸餾水製備下列濃度的葡萄
糖標準液:0%、0.4%、0.8%、1.2%、1.6% 和
2%。
2. 用移液管從每一葡萄糖標準溶液中吸取 1 cm3
溶液,然後分別放入已標示及盛有 3 cm3 本立
德溶液的試管內,並加以搖勻。
3. 將一種含還原糖的樣本(例如不知濃度的葡萄糖
液或提子提取液)用蒸餾水依據1:5、1:10、1:50、
1:100、1:500 和1:000 的比例稀釋。
4. 用移液管吸取 1 cm3 步驟3 的未稀釋及各已稀釋
溶液,分別放入另一組已標示及盛有3 cm3 本立
德溶液的試管內,並加以搖勻。
5. 將全部試管放在盛有沸水的水浴器中,加熱五分
鐘。
6. 從水浴器中取出所有試管,放在試管架上,待沉
澱物下沉。
7. 將各樣本內沉澱物的顏色及分量與各葡萄糖標
準溶液比較,便能測定樣本中等同葡萄糖的還原
糖含量。8. 計算未稀釋溶液中的還原糖含量。
在沸水中放
入六至八顆浮石,可
減低沸騰程度。